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精品推薦 | 博奧森 Rrmab?重組兔單克隆抗體!
發(fā)表者:北京博奧森生物      發(fā)表時間:2025-4-8


       博奧森生物,自2001年誕生以來,始終堅守在生命科學前沿,為全球科研人員提供優(yōu)秀品質(zhì)的免疫學試劑產(chǎn)品與服務(wù)。經(jīng)過多年深耕,博奧森已擁有成熟的蛋白表達、抗體制備、抗體驗證、單B細胞篩選、噬菌體展示、重組抗體及工業(yè)化生產(chǎn)等平臺,為我們的抗體開發(fā)奠定了扎實的基礎(chǔ)。

       Bioss始終堅持“自主研發(fā)、原始創(chuàng)新”的理念。從多克隆抗體--鼠單克隆抗體—鼠重組單克隆抗體---基于單 B 細胞分選技術(shù)的重組兔單克隆抗體,Bioss以創(chuàng)新為魂,不斷地進行技術(shù)升級與迭代。Bioss Rrmab®重組兔單克隆抗體 {R:Reliable(可靠的);r:Recombinant(重組);mab:Monoclonal antibodies (單克隆抗體)},為廣大科研工作者提供更多高品質(zhì)、可靠的抗體產(chǎn)品。

單B細胞的單克隆抗體發(fā)現(xiàn)平臺

       與傳統(tǒng)雜交瘤技術(shù)開發(fā)平臺相比,Bioss搭建的單B細胞的單克隆抗體發(fā)現(xiàn)平臺主要是依托于Bioss多年的抗體開發(fā)以及豐富的抗體標記經(jīng)驗,利用細胞分選技術(shù)從免疫的動物中分離外周血單核細胞 (PBMCs) 從而獲得抗原特異性的單個B細胞,利用分子生物學技術(shù)從抗原特異性的B細胞中獲得抗體序列信息,經(jīng)體外重組表達、篩選,獲得滿足不同應(yīng)用需求的基因工程重組兔單克隆抗體。

Rrmab®重組兔單克隆抗體的優(yōu)勢

單克隆抗體與多克隆抗體比較,在特異性和性能穩(wěn)定性上優(yōu)勢明顯;由于兔子具有特別的免疫系統(tǒng),相比其他物種來源的抗體而言,兔源重組單克隆抗體有以下一些優(yōu)勢:

①較高的親和力、較高的檢測靈敏度、較高的特異性和較高的穩(wěn)定性;

②抗體的多樣化可識別更多的表位及稀有抗原,如磷酸化抗原、碳水化合物等;特別是對于一些難開發(fā)的翻譯后修飾位點特異性抗體、小分子化合物抗體、核苷酸 (DNA/RNA) 抗體、多糖類抗體具有很大優(yōu)勢;

③抗體結(jié)構(gòu)簡單,兔IgG僅有一種亞型,更易于人源化改造;

④重組技術(shù)可提高抗體生產(chǎn)的批次間一致性;

⑤可做到無動物源成分,滿足如抗體藥物等的生產(chǎn)需求。

 

Rrmab®重組兔單克隆抗體的開發(fā)流程



1 抗原免疫Bioss運用二十多年的抗體開發(fā)經(jīng)驗,采用自主的抗原設(shè)計思路與經(jīng)驗,可選擇高質(zhì)量原核蛋白、真核活性蛋白、非修飾性多肽、修飾性多肽、小分子化合物等作為免疫原,可開發(fā)用于WB、IHC、FCM等多種應(yīng)用的抗體。 


2 細胞分選利用Bioss優(yōu)秀的標記技術(shù)和單B細胞分選策略,在Thermo Fisher的Bigfoot流式分選儀的支持下,可以有效分選、富集特異識別抗原的B細胞,提升其在體外培養(yǎng)的成活率,保留兔B細胞的多樣性,大大的提升了篩選效率。為開發(fā)滿足不同應(yīng)用的抗體提供了更多的可能性。


 

3 抗體的驗證

將分選的單個B細胞先在體外進行5~20板96孔板單B細胞培養(yǎng),然后將細胞培養(yǎng)的上清進行ELISA、WB、FCM等實驗的驗證篩選。




KO驗證

敲除驗證(KO驗證)是驗證抗體的所有方法中可接受性和可信度比較高的



4 陽性克隆測序與表達

挑選驗證數(shù)據(jù)優(yōu)異的陽性細胞克隆進行RT-PCR,來擴增其抗體可變區(qū)基因,然后進行測序。最后進行抗體的表達載體構(gòu)建、抗體的表達。得到重組兔單抗。

 

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